Як дізнатися резус-фактор крові?

Резус-фактор - один з параметрів крові, який відображає присутність або відсутність на мембранах червоних клітин особливого білка Rh. У разі, якщо він є, кров резус-позитивна і позначається Rh +, при його відсутності резус-негативної - Rh-.

Цей білок є на еритроцитах більшості живуть на планеті, але приблизно у 15% його немає. Його відсутність або присутність ніяк не позначається на здоров`ї. Rh передається від батьків і протягом усього життя залишається незмінним.

Коли здають аналіз на Rh

Визначення резус-фактора відбувається під час аналізу крові на групу. Ця інформація необхідна при переливанні, при підготовці до хірургічного втручання і в період виношування плоду.

Під час вагітності може статися конфлікт між кров`ю майбутньої матері і кров`ю дитини. Знаючи про те, що жінка резус-негативна, лікарі можуть заздалегідь вжити заходів, щоб уникнути конфлікту і зберегти здоров`я резус-позитивного плода.

Здати кров на резус можна в лабораторії будь поліклініки або в стаціонарі. Для дослідження роблять забір з пальця або з вени.

як визначають

Методів визначення Rh кілька:

• На чашках Петрі методом конглютинації.
• За допомогою Цоліклони.
• Експрес-методом в пробірках без підігріву.
• Желатиновим методом.

Суть аналізу полягає у виявленні антигену D за допомогою антирезусних сироваток або моноклональних реагентів (Цоліклони) в реакції аглютинації (склеювання еритроцитів і освіти пластівців) в пробірках або на площині.

Комплекс препаратів для визначення Rh-приналежності

На чашках Петрі

Для визначення резус-фактора знадобляться чашки Петрі, індивідуальні піпетки, розчин натрію хлориду ізотонічний, сироватки стандартні для всіх груп крові. Порядок проведення:

1. Капають поруч по дві краплі реагенту двох серій для трьох досліджень (в три ряди).
2. У кожну із серій додають по краплі досліджуваної крові і еритроцитів (контрольних позитивних і контрольних негативних).
3. Перемішують, на десять хвилин ставлять чашку на водяну баню (47 ° C).
4. Результат визначають по наявності або відсутності пластівців (злиплих еритроцитів). Якщо червоні клітини склеїлися, Rh позитивний, якщо злипання не відбулося, Rh негативний.

Визначення Rh-приналежності Цоліклони

Щоб дізнатися резус-фактор, застосовують моноклональні реагенти - Цоліклони, які отримують методом генної інженерії з асцитної рідини мишей. Rh визначається під час реакції аглютинації, яка відбувається на площині.

Алгоритм дій:

1. На планшет індивідуальної піпеткою капають велику краплю реагенту (приблизна кількість - 0,1 мл).
2. Близько реагенту капають досліджувану кров (маленьку краплю) або еритроцити в кількості 0,01 мл.
3. За допомогою скляної палички як слід змішують реагент і кров і кожні 30 секунд тарілку похитують протягом трьох хвилин, спостерігаючи за реакцією візуально.
4. Реакція аглютинації починається через 15 секунд, явно вираженою стає через 1 хвилину, але результат враховують тільки через три хвилини.

Якщо почалася реакція аглютинації (склеювання еритроцитів і випадання їх в осад), кров маркують резус-позитивною, якщо злипання червоних клітин не спостерігається, резус-фактор негативний. Склеєні еритроцити, які представляють собою пластівці, видно неозброєним оком.

Результат трактується в залежності від того, чи відбулася аглютинація червоних клітин

Експрес-метод

В якості реагенту застосовується сироватка під назвою «антирезус», яка є універсальною для всіх груп крові.

1. У пробірку поміщають краплю крові (еритроцитів) в кількості 0,05 мл, потім додають 2 краплі реагенту «антирезус».
2. Пробірку повертають, що не струшуючи, щоб вміст перемішалося і рівномірно розтеклося по склу.
3. Приблизно через три-п`ять хвилин відбувається склеювання еритроцитів.
4. Щоб виключити агрегацію червоних клітин, в пробірку додають розчин ізотонічний NaCl в кількості 2-3 мл і кілька разів перевертають пробірку, щоб вміст перемішалося.
5. Після цього зчитують результат. Якщо з`явилися пластівці на тлі більш світлої рідини, Rh позитивний, якщо пластівців немає, рідина забарвлена рівномірно в рожевий колір, Rh - негативний.

Потрібно сказати, що універсальні сироватки можуть дати хибно позитивну реакцію з Rh-негативними еритроцитами. Може статися неспецифічне склеювання червоних клітин, на поверхні яких є інші антитіла - НЕ атірезус. Тому паралельно проводять тестування з контрольним розчином підсилювача. Якщо після введення контрольного розчину відбувається аглютинація, результат вважається недостовірною, і тестування повторюють з іншим реагентом.

Пробірочний метод визначення Rh

Із застосуванням желатину

Ця методика заснована на застосуванні желатину (у вигляді розчину 10%). Для тестування використовуються і стандартні антирезусні реагенти, і Цоліклони.

1. В пробірку капають одну краплю крові (0,05 мл) або еритроцитів у вигляді суспензії в сироватці (50%).
2. Потім 2 краплі підігрітого заздалегідь до рідкого стану розчину желатину.
3. Далі 2 краплі реагенту, потім змішують.
4. Пробірку ставлять на п`ять-десять хвилин на водяну баню (47 ° C) або на півгодини в сухий термостат з такою ж температурою.
5. Потім в пробірку додають фізіологічний розчин (5-8 мл), закривають кришкою і обережно повертають два-три рази, щоб перемішати.
6. Для визначення наявності пластівців вміст пробірки оглядають неозброєним оком на світло або через збільшувальне скло.

При використанні желатину не відбувається неспецифічної аглютинації. Після проведення такої проби необхідні контрольні тести:

• зі стандартними Rh + еритроцитами;
• зі стандартними Rh- еритроцитами;
• з досліджуваної кров`ю (еритроцитами) і желатином.

висновок

Інформація про резус-факторі необхідна в разі переливання крові. Для гемотрансфузії може бути використана тільки сумісна по групі і по резус кров. Крім цього, слід визначити резус-фактор під час вагітності. Ще краще пізнати його на етапі її планування. Це необхідно, щоб запобігти резус-конфлікт між Rh-позитивним плодом і Rh-негативною жінкою.